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根據(jù)我公司進(jìn)口ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)部多年的經(jīng)驗(yàn)以及客戶(hù)們的咨詢(xún)問(wèn)題總結(jié),整理分析出了幾個(gè)需要嚴(yán)格注意的方面,實(shí)驗(yàn)者們隨我公司來(lái)看一看吧(供參考)。
1. 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉:曾用洗瓶直接沖洗板。ELISA試劑盒后來(lái)雖然也用槍逐孔洗板,但對(duì)此注意不夠。
2. 加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡:終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。
3. 讀板時(shí)板底不清潔:難免洗板后板底有水漬,這也可能導(dǎo)致讀數(shù)不準(zhǔn)。
4. 加樣板過(guò)多、加樣速度慢,造成各孔反應(yīng)時(shí)間不均一:但溫度高時(shí),加樣時(shí)間過(guò)長(zhǎng)將導(dǎo)致各孔時(shí)間的反應(yīng)時(shí)間不均一;還使得孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。如果連續(xù)做好幾塊板,則有可能使某些板不能及時(shí)洗板,也導(dǎo)致孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)。
5. 溫育溫度的選擇
說(shuō)明書(shū)表明的溫度可有兩種(①37℃下1小時(shí)、②43℃下45分鐘),從免疫測(cè)定的抗原抗體反應(yīng)的本質(zhì)來(lái)看,在較低的溫度下反應(yīng)較長(zhǎng)的時(shí)間zui為*。ELISA試劑盒我公司建議在臨床ELISA測(cè)定中盡量使用較低溫育溫度較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件。
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