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干細(xì)胞的培養(yǎng)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前遺傳學(xué)確診,但其生物學(xué)性狀和在體內(nèi)的來歷仍沒有*明晰。羊水中包含了多種異質(zhì)細(xì)胞群,這些細(xì)胞首要來歷于胎兒的肌膚,胎兒的消化器官、呼吸器官和尿道,以及羊膜上皮。間充質(zhì)干細(xì)胞( MSCs) 是干細(xì)胞宗族的首要成員,來歷于發(fā)育前期的中胚層和外胚層。MSCs 開始在骨髓中發(fā)現(xiàn),因其具有多向分化潛能、造血支持和推動干細(xì)胞植入、免疫調(diào)控和自我拷貝等特征而日益遭到我們的注重。
均有成功分別羊水來歷干細(xì)胞的報道,大多是運(yùn)用羊水細(xì)胞貼壁的特征通過多次傳代的方法獲得干細(xì)胞。Tsai MS 等選用兩步培養(yǎng)法從孕中期羊水中成功分別出具有MSCs 特征的干細(xì)胞。隨后De Coppi 等通過免疫磁珠方法分別出c - Kit ( CD117) 陽性細(xì)胞,這些細(xì)胞在體外增殖靈敏,可以構(gòu)成安穩(wěn)的細(xì)胞系,他將這些細(xì)胞命名為羊水干細(xì)胞。此外通過克隆化培養(yǎng)的方法也可以從羊水中獲得干細(xì)胞。從現(xiàn)有研討情況看來,如今沒有構(gòu)成一起的羊水干細(xì)胞培養(yǎng)體系。
國產(chǎn)ELISA試劑盒選用貼壁法分別獲得羊水細(xì)胞,培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)用低糖DMEM 培養(yǎng)基。收集的20 例羊水標(biāo)本中有17 例原代培養(yǎng)成功,并獲得可以繼續(xù)傳代的安穩(wěn)細(xì)胞系。培養(yǎng)的羊水細(xì)胞體外添加靈敏,倍增時間約36h。流式細(xì)胞儀查看閃現(xiàn)細(xì)胞表達(dá)CD29、CD44、CD105 等間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志,不表達(dá)造血干細(xì)胞表面標(biāo)志CD45 和CD133。RT - PCR 的成果標(biāo)明分別獲得的干細(xì)胞表達(dá)Oct - 4 和Nanog 基因,且不相同代的細(xì)胞間均有表達(dá)。Oct - 4 和Nanog 被認(rèn)為是干細(xì)胞多能分化的首要調(diào)理因子,干細(xì)胞分化后其表達(dá)當(dāng)即下調(diào)。以上成果與文獻(xiàn)報道一起,標(biāo)明羊水細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)擴(kuò)增可以得到具有MSCs 性質(zhì)的干細(xì)胞。